Základní proces PCR detekce nového koronaviru
1. Odběr vzorků: Současný odběr vzorků z horních cest dýchacích (včetně nosohltanu a orofaryngu) a dolních cest dýchacích (včetně sputa, tracheálního aspirátu nebo tekutiny z bronchoalveolární laváže) pro detekci nCoV pomocí RT-PCR. Tam, kde jsou snadno dostupné vzorky z dolních cest dýchacích: pro odběr vzorků používejte vhodné OOP (všimněte si vzorků URT pro opatření týkající se kapek a expozice a vzorků LRT pro opatření ve vzduchu) Při odběru vzorků URT použijte tampony na odběr vzorků virů (sterilní polyester nebo umělé hedvábí místo bavlny) a virové transportní médium. Neodebírejte vzorky z nosních dírek nebo mandlí. U pacientů s podezřením na nCoV, zejména u pacientů s pneumonií nebo těžkých pacientů, nemůže jediný vzorek URT vyloučit diagnózu a doporučuje se zvýšit počet vzorků URT a LRT.
2. Extrakce nukleové kyseliny: přístroj pro extrakci nukleové kyseliny nebo manuální extrakce nukleové kyseliny
1), nepotřebujete nástroje, použijte ruční extrakci
Vybavení a laboratorní spotřební materiál potřebný pro extrakci nukleové kyseliny a izolaci vzorku:
biologické bezpečnostní skříně (funkce: separace vzorků, zajištění personálu, vzorků a ochrana životního prostředí),
Stolní vysokorychlostní chlazená odstředivka (funkce: rychlost větší nebo rovna 12 000 ot./min., analýza nukleových kyselin atd.),
Nízkoteplotní chladnička (funkce: skladování reagencií),
Kovová lázeň, pipeta (funkce: přesné dávkování),
Sterilizované centrifugační zkumavky (funkce: separace nukleových kyselin atd.),
Latexové rukavice (funkce: proti znečištění),
Absolutní ethanol, isopropanol, voda bez DNázy a RNázy (voda neupravená DEPC).
3. Automatická extrakce nukleových kyselin: (automatická extrakce, 32 vzorků lze extrahovat jednou za 26 minut)
Odpovídající předinstalovaná deska je přímo vložena a vyjmuta přímo na stroji:
4. Fluorescenční kvantitativní PCR detekce:
Požadované vybavení a spotřební materiál: biologická bezpečnostní skříň (funkce: příprava vzorků, zajištění personálu, vzorků a ochrana životního prostředí),
Fluorescenční kvantitativní PCR přístroj (funkce: PCR amplifikace detekce a analýza),
Stolní vysokorychlostní chlazená odstředivka (funkce: rychlost větší nebo rovna 12000 ot./min),
Mraznička s nízkou teplotou (uložení vzorku při -86 stupních, skladování reagencií při -20 stupních a 4 stupních),
oscilátor, (mix)
Odstupňované špičky pipety (funkce: Přesné plnění), 1-10velikost ul
Sterilizované centrifugační zkumavky (0,5/1,5/2ml),
0,2ml zkumavka/destička pro PCR optické kvality (funkce: reakční zkumavka PCR),
Latexové rukavice (funkce: proti znečištění).
Extrakce nukleové kyseliny, konfigurace reakčního systému a interpretace výsledků jsou předmětem instrukcí sady.
