Aplikace lahvičky se sérem
Lahvička se sérem je vyrobena z borosilikátového skla s nízkou extrakcí a bezbarvá čirá lahvička splňuje požadavky USP typu I a ASTM E 438 typu I standardní třídy A. Může být autoklávován při 121 ° C po dobu 20 minut a může být rozdělen na 125 ml, 250 ml, 500 ml, 1 L, 2 L podle objemu.
Sérová láhev je nádoba pro skladování séra, která je obvykle vyrobena z PET materiálu procesem vstřikování. Médium je živina potřebná pro růst buněk. Podle svého zdroje je rozdělen na syntetické médium a přírodní médium, které lze skladovat v lahvích séra.
Lahvička se sérem
Přírodní médium:
Nejčastěji používaným přírodním médiem je sérum, v podstatě telecí sérum. Sérum obsahuje řadu buněčných růstových faktorů, faktorů podporujících adhezi a jejich multiaktivních látek. V kombinaci se syntetickým médiem se buňky mohou množit a hladce růst. Sérum je třeba skladovat ve speciálních lahvičkách séra při teplotě -5 °C až -20 °C.
Syntetické médium:
Syntetické médium je přísně formulováno podle typu a množství látek požadovaných buňkami. Existuje mnoho typů a známých složek, což usnadňuje kontrolu experimentálních podmínek. Obsahuje sacharidy, aminokyseliny, lipidy, anorganické soli, vitamíny, stopové prvky a faktory růstu buněk. Ve srovnání s přírodním médiem však některé přírodní neznámé složky nemohou být nahrazeny známými chemickými složkami. Proto základní syntetické médium používané v buněčné kultuře musí také přidávat určité množství přírodních složek média, aby překonalo syntetickou kulturu. Nedostatečná báze, nejběžnější praxí je přidání telecího séra.
Tvar lahvičky se sérem je čtvercový, snadno uchopitelný, odolný vůči většině kyselin a alkalické koroze, teplota křehkosti je -70 °C a stále má určitou houževnatost při -30 °C. Je to dobrý obalový kontejner, ať už se jedná o přírodní médium nebo syntetickou kulturu. lze skladovat v lahvičkách séra.
Pro izolaci, kultivaci a identifikaci endoteliálních progenitorových buněk lidské pupečníkové krve a zřízení acelulárních cévních lešení zlepšenou metodou zmrazení a rozmrazení
Prozkoumat proveditelnost a klinickou aplikační hodnotu endoteliálních progenitorových buněk izolovaných a kultivovaných z lidské pupečníkové krve.
Metody: Pupečníková krev plodů podstupujících plnohodnotný císařský řez na Gynekologicko-porodnickém oddělení, první přidružené nemocnici Bengbu Medical College byla odebrána, umístěna do sérové láhve obsahující 50U / ml heparinu za aseptických podmínek, uložena v ledové krabici o teplotě 4 ° C a transportována do buněk V kultivační místnosti, mononukleární buňky pupečníkové krve byly získány centrifugací gradientu hustoty. Získané mononukleární buňky byly rozděleny na dvě části a bylo přidáno médium M199 séra plodu (FCS-M199) a autologní sérum M199 (AS-M199). A byly nasazeny do kultivačních misek s lidským fibronektinem (HFN) a bez něj (označené jako: F(0), F(1), A(0), A(1)). In vitro byla provedena indukce, diferenciace a expanze.
Morfologické změny adherentních buněk během celého procesu indukce a diferenciace byly pozorovány a byly identifikovány z různých úhlů v kombinaci s příbuznými technikami, jako je imunohistochemie, imunofluorescence a průtoková cytometrie.
Výsledky: Po 12 dnech kultivace začaly mononukleární buňky pupečníkové krve přilnout. Po 3D se začal objevovat tvar vřetena a pak se počet přilnavých buněk postupně zvyšoval a postupně se stával vřetenovitým. Při kultivaci po dobu až jednoho týdne se vytvoří typická kolonie s vřetenovými buňkami kolem a kulatými buňkami ve středu. Když byly buňky kultivovány po dobu 14 dnů, propojené buněčné klastry se postupně spojily a vytvořily síťovou strukturu. Současně s neustálým prodlužováním doby kultivace se také dlouhé vřetenové buňky začaly postupně zkracovat a vykazovaly typickou změnu podobnou dlažebnímu kameni.
Adherentní buňky byly kultivovány po dobu jednoho týdne a bylo zjištěno, že počet buněk v médiu s lidským fibronektinem byl významně vyšší než počet buněk bez lidského fibronektinu a nedošlo k žádné významné změně v počtu buněk ve dvou různých médiích.
