Praktický průvodce výběrem pipety

Sep 16, 2022 Zanechat vzkaz


Široce používané a používané v různých laboratořích, mechanické pipety jsou odolné nástroje. Obvykle se používají několik hodin denně, takže ergonomie a osobní preference, včetně pohodlí obsluhy, jsou zásadními kritérii výběru.


Při hledání nejlepší pipety pro danou úlohu je třeba vzít v úvahu i další relevantní faktory, jako je aplikace, laboratorní pracovní postup, fyzikální vlastnosti vzorku, požadovaný rozsah objemu a požadavky na přesnost a preciznost.


Přesnost a preciznost

Přesnost a přesnost jsou dva hlavní aspekty výběru dobré pipety. Přesnost znamená, že dodaný objem odpovídá nastavenému objemu. Přesnost je vyjádřením toho, jak blízko jsou výsledky několika pipetování. Zde jsou nějaké příklady:

přesné, ale ne přesné

Výsledky jsou přesné, ale nepřesné: průměrný objem souhlasí s nastaveným objemem, ale výsledky jednotlivých pipet se od sebe liší.

pipeta

přesné, ale ne přesné

Výsledky jsou přesné, ale nepřesné: mezi výsledky pipetování je jen malý rozdíl; průměrná hlasitost je však nezávislá na nastavené hlasitosti.

pipeta

přesné a přesné

Výsledky jsou přesné a přesné: průměrná hlasitost se rovná nastavené hlasitosti; mezi výsledky pipetování jsou jen malé rozdíly.

pipeta

Pojmy přesnost a přesnost jsou ve specifikaci pipety uvedeny jako procento systematické chyby (procento nepřesnosti) a procento náhodné chyby (procento nepřesnosti). Je důležité si uvědomit, že tyto specifikace jsou platné pouze při použití špiček pipet od výrobce.

Nejlepší přesnosti je dosaženo s vysoce kvalitními, profesionálně kalibrovanými a dobře udržovanými pipetami a nezbytnými vysoce kvalitními špičkami. Na druhou stranu je přesnost do značné míry ovlivněna zkušenostmi s pipetováním a správnými laboratorními postupy, jako je správný úhel pipetování, konzistentní rytmus pipetování a optimální rychlost pipetování.

Pro zajištění nejvyšší úrovně přesnosti by měl uživatel zvolit pipetu s nejmenším objemem schopnou zpracovat příslušný objem. To je kritické, protože přesnost pipetování klesá, když se dávkovaný objem blíží minimálnímu objemu pipety.

Například použití 1 ml pipety při dávkování 10 ul kapaliny bude mít za následek nízkou přesnost, 300 ul pipeta je lepší a 10 ul pipeta je ještě lepší.

Kromě toho, aby byly zajištěny dobré výsledky pipetování, je důležité vybrat si pipetu s nízkými sílami při pipetování, zatížení špičky a vysunutí špičky.

Vysoké síly pravděpodobněji způsobí únavu svalů paží a rukou, což vede k riziku nedostatečných výsledků, zejména u dlouhých pipetovacích sérií. Uživatelům se doporučuje, aby si byli vědomi následujících vlastností, které mohou ovlivnit výkon a spolehlivost výsledků pipetování:

Barevné kódování pipety nebo uzávěru pipety – pomáhá uživateli vybrat správnou špičku pro pipetu.

Snadno kalibrujte různé druhy kapalin. Je také výhodné, pokud lze nastavení uložit pro pozdější použití.

Zámek úpravy objemu – Tato funkce pomáhá omezit náhodné změny objemu během pipetování. Zvláštní pozornost je třeba věnovat také spolehlivosti, ergonomii a intuitivnosti mechanismu.

Ergonomie

Pipetování je jednou z nejčastěji prováděných úloh v laboratoři. Studie prokázaly, že kontinuální pipetování je spojeno se zvýšeným rizikem muskuloskeletálních poruch horních končetin, přičemž více než 40 procent laboratorních odborníků potenciálně trpí poruchami spojenými s pipetováním. *

Kromě toho, že způsobují nepohodlí, mohou zranění ruky nebo paže omezovat úroveň výkonu a mohou mít vedlejší účinky, pokud jde o přesnost, přesnost a spolehlivost výsledků. Aby byla pipeta co nejergonomičtější, je důležité při výběru pipety věnovat velkou pozornost následujícím vlastnostem:

Design a vyvážení rukojeti

Usazení mezi pipetou a rukou by mělo být pohodlné a podpora prstů by měla usnadnit držení pipety. Navíc dobře vyvážená pipeta s těžištěm v blízkosti dlaně poskytuje stabilitu a výrazně snižuje namáhání svalů ruky a točivý moment zápěstí.

Požadovaná pipetovací síla

Se zvyšující se silou pipetování roste i riziko RSI. Navíc snižuje přesnost a přesnost dlouhých sérií pipet. Síla potřebná k posunutí pístu k první zarážce je typicky mezi 3 a 15 N. Síla potřebná k přitlačení pístu k druhé zarážce však může dosáhnout 40 N.

Jednoduchý test může porovnat pipetovací sílu dvou pipet přitlačením pístů proti sobě. Jako první se pohne píst, který ukazuje nižší pipetovací sílu.

Vhodné pro praváky i leváky

Pipeta by měla být vhodná pro praváky i leváky. Všechny operace by měly fungovat stejně dobře v obou směrech. Displej by měl být také dobře čitelný bez ohledu na orientaci.

výstup sací hlavy

Vysunutí špičky obvykle vyžaduje větší sílu než pipetování. Vysoká síla vysunutí špičky mechanických pipet může představovat riziko zranění, zejména při provádění opakovaného pipetování. Typické vyhazovací síly hrotu se pohybují od 15 do 30 N.

Načítání hrotu

Kromě vysunutí špičky vyžaduje nakládání špičky největší sílu během celého procesu pipetování. Zatěžovací síla špičky je síla potřebná k bezpečnému připevnění špičky k pipetě. Nevhodné hroty je třeba poklepat, protřepat nebo dokonce ručně utáhnout, aby bylo zajištěno správné utěsnění. Síly lze omezit použitím správně nasazených špiček.

Zobrazení rozsahu

Aby se pipeta nenacházela v nevhodné poloze, objem by měl být při normálním pipetování snadno čitelný. Také, čím větší číslo, tím snazší je čtení.

Nastavení rozsahu

Nastavení objemu pipet by mělo být snadné a ergonomické. Aby se předešlo zbytečnému tlaku na palec, mělo by být snadné nastavit hlasitost oběma rukama – jednou rukou držte pipetu a druhou otáčejte nastavovacím kolečkem.

hmotnost a délku

Pokud je pipeta lehčí a kratší, je ergonomičtější.

*Bjorksten, MG, B. Almby a E., S. Jansson. 1994, Frederickson, K. 1995

zabránit znečištění

Abyste zabránili šíření aerosolů nebo kapiček vzorku při vysunutí špičky, vyberte pipetu s jemným vysunutím špičky. Když je hrot jemně vysunut, je méně pravděpodobné, že se kapičky nebo aerosoly, které za nimi zůstanou, rozšíří na velkou plochu.

Pro rychlé a pohodlné dekontaminační postupy si vyberte mechanické pipety, které lze autoklávovat bez demontáže – to je k dispozici také u vícekanálových modelů. Výběr pipet by měl být založen na možnosti, že nabízejí použití filtrů na kuželech špiček.

Kuželový filtr zabraňuje vnikání aerosolů a kapalin do vnitřních součástí pipety. Jsou také úsporným a účinným způsobem, jak zabránit kontaminaci vzorku. Alternativně lze v aplikaci použít filtrované špičky pipet.

Jednokanálové nebo vícekanálové pipety?

Jednokanálové pipety jsou tahounem manipulace s kapalinami. Jsou k dispozici v řadě modelů s nastavitelným a pevným objemem. Pipety s nastavitelným objemem znamenají, že dávkovaný objem lze měnit podle potřeby, zatímco pipety s pevným objemem dávkují vždy stejné množství kapaliny.

Pipety s pevným objemem zabraňují chybám při dávkování v důsledku nesprávného výběru objemu. Jsou ideální pro aplikace s konstantním dodáváním kapaliny a jsou ideální pro začátečníky a necertifikované techniky.

Zde jsou nejdůležitější body, které je třeba vzít v úvahu při výběru vícekanálové pipety:

Zkontrolujte polohu spodní části pipety a zjistěte, zda lze pipetu nastavit o 360 stupňů, aby bylo zajištěno ergonomické pipetování.

Zkontrolujte, zda lze špičku snadno vysunout.

Ujistěte se, že pipeta poskytuje rychlé, bezpečné a současné vkládání špiček pro všechny špičky. Mělo by být možné nasadit hrot rovnoměrně bez použití příliš velké síly.

pipeta

Vzduchové nebo odměrné pipety?

Existují dva typy mechanických pístových pipet: vzduchové pipety a objemové pipety.

Pipety pro vytlačování vzduchu, vyvinuté s ohledem na obecnou laboratorní práci a vzorky vody, mají vzduchový sloupec mezi pístem a kapalinou. Tento typ pipety se používá pro většinu pipetovacích prací v laboratoři.

pipeta

Jak fungují vzduchové pipety

Objemové pipety jsou navrženy pro manipulaci s náročnými vzorky, jako jsou extrémně viskózní, těkavé, radioaktivní nebo korozivní kapaliny. U této pipety je píst v přímém kontaktu s kapalinou, což snižuje riziko kontaminace téměř na nulu.

Objemové pipety vyžadují použití speciálních špiček, a proto jsou dražší než pipety s vytlačováním vzduchu.

pipeta