Jak používat lahvičku se sérem pro inaktivaci séra
Jako živina potřebná pro buněčný růst je úloha séra v buněčné kultuře samozřejmá a kvalita a sterilita séra jsou také klíčem k určení úspěchu experimentu. Jak tedy sérum deaktivovat? To vyžaduje použití lahviček se sérem.
Kroky inaktivace séra jsou následující:
1. Vyberte lahvičku, která je stejná jako lahvička se sérem jako kontrolní lahvička, nalijte do kontrolní lahvičky stejný objem destilované vody jako sérum a změřte teplotu.
2. Nastavení teploty. Do lahvičky kontrolní skupiny vložte dva rtuťové teploměry a vložte je do vodní lázně. Když teploměr ukazuje 56 stupňů, upravte teplotu kalibrační vodní lázně na 56 stupňů.
3. Lahvičku se sérem a kontrolní lahvičku dejte dohromady do vodní lázně, upravte teplotu na 56 stupňů a dejte se na půl hodiny do vodní lázně. Po deaktivaci je rozdělte do lahví, proveďte aseptické experimenty a skladujte je při -70--20 stupních.
4. Pro pozorování barvy a průhlednosti zmrazeného séra, pokud je barva načervenalá nebo je barva světlejší s precipitací, znamená to, že kvalita séra není dobrá, proto je nutné vybrat kvalitní sérum pro inaktivaci .
5. Použití séra by se mělo vyhnout opakovanému rozmrazování, které zvýší pravděpodobnost kontaminace séra a sníží kvalitu séra. Jakmile se opakovaně rozmrazené sérum vysráží, znamená to, že sérum je nedostupné nebo má špatnou kvalitu.
6. Aby byla zajištěna stabilita experimentálních výsledků, zajistěte, aby bylo sérum při dělení lahvičky dobře protřepáno a poté lahvičku rozdělte a zkuste použít stejné sérum, aby byl zajištěn princip jednotných proměnných.
Výše uvedené jsou konkrétní kroky inaktivace séra pomocí sérových lahviček, ale stojí za zmínku, že ve většině buněčných kultur není tepelná inaktivace séra nutná. V mnoha případech tepelná inaktivace nezlepší buněčný růst, ale místo toho ničí sérum a zvyšuje precipitaci. Pokud literatura neuvádí použití inaktivovaného séra pro buňky, krok tepelné inaktivace séra lze obecně u buněčné kultury vynechat.
